培养基(DTA)
蛋白胨 10g 葡萄糖 5g 2%溴甲酚紫乙醇溶液2mL 2%的琼脂
蒸馏水1000mL pH6.7±0.1
啤酒酵母膏中嗜热菌体的筛选
1.将各成分混悬于蒸馏水中，静止5min ，混合均匀，加热，并不断搅拌1min，分装于三角瓶中121℃ 高压灭菌 40min
2.在超净工作台中无菌称量适量样品，加入到预先灭好菌的蒸馏水中（保持水的温度为40-45°C）稀释，并且迅速振摇容器，使之混匀。
3.立即用吸量管吸取悬浮液，加入到盛有无菌DTA（溶液温度为50-60°C）的三角瓶中。
4.迅速振摇三角瓶，重新混匀。haicent.com混匀后立即将三角瓶放入到预先加热好高压灭菌锅中，加热到5磅压力（温度为108.4°C），保持10min ,然后将高压锅迅速排气。立即将三角瓶从高压灭菌锅中取出，冷却。
5.轻轻地摇动锥形瓶，将瓶中的培养基均匀分配到灭菌平皿中，琼脂凝固。
6.将平板倒置，在55±2℃ 的培养箱中72小时培养。挑取不同菌体形态的单克隆到斜面备用。
单菌落的平板培养
取斜面菌体，生理盐水适当稀释，采用倾注法，倒平板，72h、55°C倒置培养。
分离嗜热菌的液体培养
按约0.3×105个/ml的量接种液体培养基（不加琼脂的DTA培养基），55℃振荡培养。不定时取样，血球计数板计数。
高温培养注意事项：
1. 配制培养基时应先调完pH后，方可加入指示剂。
2. 由于采用高温培养，平板易脱水，因此可以在培养箱中放置一杯水，另外用塑料袋套上平皿，可有效防止平板脱水，裂块。
3. 当需要考察高温培养时（70℃以上时），可将琼脂浓度调高到2.5%，防止倒置培养时，由于高温引起琼脂脱落。
